志賀氏菌檢測

志賀氏菌檢測：關鍵檢測項目與技術解析

摘要 志賀氏菌（Shigella）是引發細菌性痢疾（志賀菌?。┑闹饕≡w，其傳播途徑以糞-口為主，可通過污染的水源、食物或直接接觸傳播。由于志賀氏菌感染具有高傳染性和潛在重癥風險，快速、準確的檢測對臨床診療、食品安全及公共衛生防控至關重要。本文系統梳理志賀氏菌的核心檢測項目、技術方法及其應用場景，為相關領域提供參考。

一、志賀氏菌檢測的重要性

志賀氏菌分為4個血清群（A-D群），包括痢疾志賀菌、福氏志賀菌、鮑氏志賀菌和宋內志賀菌，其中痢疾志賀菌致病性強。感染后表現為發熱、腹痛、膿血便等癥狀，嚴重者可導致脫水、中毒性休克甚至死亡。由于抗生素濫用導致的耐藥菌株增加，早期診斷和檢測成為防控關鍵。

二、核心檢測項目

志賀氏菌檢測需覆蓋臨床診斷、食品衛生、環境監測等多場景，主要檢測項目包括：

1. 病原學檢測

• 樣本類型：糞便（臨床）、食品（如生鮮果蔬、乳制品）、水體、環境拭子等。
• 檢測目標：活菌分離、菌株分型、毒力基因鑒定及耐藥性分析。

2. 常規檢測項目

• 細菌培養與生化鑒定

  • 步驟：選擇性培養基（如SS瓊脂、XLD瓊脂）初篩→三糖鐵試驗（TSI）→血清凝集試驗分型→生化反應（氧化酶、動力試驗等）。
  • 優勢：金標準，可分離活菌用于進一步研究。
  • 局限：耗時長（3-5天），靈敏度受樣本中菌量影響。

• 免疫學檢測

  • 方法：酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、膠體金試紙條、免疫熒光法。
  • 目標：檢測志賀氏菌特異性抗原（如O抗原）或毒素。
  • 特點：快速（1-2小時），適合現場篩查，但可能存在交叉反應。

• 分子生物學檢測

  • 技術：PCR、實時熒光定量PCR（qPCR）、基因測序、環介導等溫擴增（LAMP）。
  • 靶標基因：ipaH（毒力基因）、rfc（O抗原合成基因）、耐藥基因（如blaCTX-M）。
  • 優勢：高靈敏度、特異性，可同時檢測多毒力因子及耐藥性，適用于復雜樣本。

3. 分型與溯源檢測

• 血清分型：通過多價抗血清確定菌株血清群（如A群痢疾志賀菌）。
• 分子分型：脈沖場凝膠電泳（PFGE）、多位點序列分型（MLST）、全基因組測序（WGS），用于暴發溯源和流行病學研究。

4. 藥敏試驗

• 方法：紙片擴散法（K-B法）、微量肉湯稀釋法。
• 意義：指導臨床用藥，監測耐藥趨勢（如對環丙沙星、阿奇霉素的耐藥率）。

三、檢測標準與流程

1. 臨床檢測
   • 依據《WS/T 498-2017 細菌性痢疾診斷標準》，優先采用培養+PCR確認。
2. 食品檢測
   • 參照GB 4789.5-2016，需經增菌、選擇性培養、生化及血清學驗證。
3. 環境監測
   • 水體樣本需濃縮處理后接種培養基，結合分子檢測提高靈敏度。

四、新興技術與發展趨勢

1. 快速檢測設備：便攜式qPCR儀、微流控芯片可在2小時內完成檢測。
2. 宏基因組測序：直接分析樣本中微生物群落，無需培養，適用于未知病原篩查。
3. 生物傳感器：基于納米材料或CRISPR技術的傳感器，實現超靈敏檢測。

五、挑戰與展望

• 難點：低菌量樣本易漏檢，需優化前處理技術（如免疫磁珠富集）。
• 方向：開發多聯檢試劑盒（同步檢測志賀氏菌、沙門氏菌等），推動自動化檢測平臺普及。

結論 志賀氏菌檢測需結合傳統方法與分子技術，針對不同場景選擇優策略。未來，隨著醫學和智能技術的發展，檢測將更快速、集成化，為疾病防控和食品安全提供更強保障。

參考文獻 [1] WHO. Guidelines for the control of shigellosis. [2] 中國食品安全風險評估中心. GB 4789.5-2016 食品微生物學檢驗 志賀氏菌檢驗. [3] 美國CDC. Shigella Surveillance Protocol.