蛋白質檢測

蛋白質檢測：核心檢測項目與技術應用

蛋白質作為生命活動的關鍵分子，其檢測在醫學、食品工業、生物制藥等領域具有重要價值。本文系統梳理蛋白質檢測的核心項目、技術原理及實際應用場景，為相關領域提供參考。

一、醫學診斷領域的蛋白質檢測

1. 疾病標志物檢測

• 腫瘤標志物：AFP（肝癌）、PSA（前列腺癌）、CA125（卵巢癌）的定量分析，采用化學發光法或電化學發光法檢測，靈敏度可達pg/mL級
• 心血管疾病：肌鈣蛋白I/T（心肌梗死）、BNP（心力衰竭）的快速檢測，POCT設備可在15分鐘內完成定量分析
• 炎癥指標：C-反應蛋白（CRP）檢測，膠體金免疫層析法實現床旁即時檢測

2. 代謝功能評估

• 肝功能：前白蛋白（半衰期2天）比傳統白蛋白（半衰期20天）更靈敏反映急性肝損傷
• 腎功能：尿微量白蛋白檢測（mAlb），采用免疫比濁法檢測30-300mg/24h的早期腎損傷

3. 遺傳性疾病篩查

• 血紅蛋白電泳檢測異常血紅蛋白變體
• 血清免疫固定電泳診斷多發性骨髓瘤

二、食品工業質量控制

1. 營養指標檢測

• 凱氏定氮法（國標GB 5009.5）測定粗蛋白含量，誤差范圍±0.2%
• 近紅外光譜技術實現在線快速檢測，檢測速度達500樣本/小時

2. 過敏原檢測

• ELISA法檢測花生、牛奶等過敏原，檢測限可達1ppm
• 實時熒光PCR輔助驗證蛋白質成分

3. 加工特性分析

• SDS-PAGE檢測蛋白質分子量分布
• 表面疏水性測定（ANS熒光探針法）評估蛋白功能特性

三、生物醫藥研發應用

1. 藥物開發

• SPR技術實時監測藥物-靶標蛋白結合動力學（KD值測定）
• 圓二色譜分析蛋白質二級結構變化

2. 疫苗生產

• SEC-HPLC檢測蛋白聚合體含量，控制≤5%的質量標準
• 宿主細胞蛋白（HCP）ELISA檢測，靈敏度達1-2ng/mL

3. 基因治療

• 腺相關病毒衣殼蛋白滴度檢測（A280法與ELISA相關性分析）
• 質譜法鑒定病毒載體蛋白修飾

四、檢測技術比較與選擇

五、發展趨勢與挑戰

1. 多組學聯合檢測：蛋白質組與代謝組數據整合分析
2. 微型化設備：基于MEMS技術的便攜式質譜儀研發
3. 人工智能應用：深度學習輔助蛋白質結構預測與功能解析
4. 標準化難題：不同平臺間檢測結果的一致性驗證

隨著單分子檢測技術和空間蛋白組學的突破，蛋白質檢測正朝著超高靈敏度、單細胞分辨率和原位分析方向快速發展。檢測項目的選擇需綜合考慮檢測目的、樣本類型和成本效益，建立完善的質控體系是確保結果準確性的關鍵。

本文數據參考2023版《臨床檢驗操作規程》及Nature Methods新技術指南