大腸菌群、耐熱大腸菌群檢測

大腸菌群與耐熱大腸菌群檢測的意義

大腸菌群和耐熱大腸菌群是評估食品、飲用水及環境樣品衛生安全的重要指標。大腸菌群主要包括大腸埃希氏菌、克雷伯氏菌等，其存在可能預示樣品受到糞便污染，進而帶來致病風險。耐熱大腸菌群（又稱糞大腸菌群）是大腸菌群中能在44.5℃高溫下生長的亞群，其檢測結果更能直接反映近期糞便污染情況。通過檢測這兩類微生物，可有效監控生產過程中的衛生狀況，保障公眾健康安全，同時也是食品、藥品、水質等領域質量控制的強制性要求。

主要檢測項目與標準

檢測項目主要包括：
1. 大腸菌群總數測定（MPN法或平板計數法）
2. 耐熱大腸菌群確認試驗（選擇性培養與生化鑒定）
3. 大腸埃希氏菌特異性檢測（如β-葡萄糖醛酸酶試驗）
檢測標準依據包括：
- 標準GB 4789.3《食品安全標準 食品微生物學檢驗 大腸菌群計數》
- 《生活飲用水衛生標準》GB 5749配套檢驗方法
- ISO 9308-1水質檢測標準

常用檢測儀器與設備

檢測過程中需使用儀器設備：
? 恒溫培養箱（36±1℃和44.5±0.5℃雙溫區）
? 膜過濾裝置（用于水樣檢測）
? 自動菌落計數儀
? PCR儀（分子生物學快速檢測）
? 生物安全柜（確保操作無菌環境）
? 高壓滅菌鍋（培養基及器具滅菌）

核心檢測方法詳解

1. 多管發酵法（MPN法）
采用乳糖膽鹽發酵管進行初發酵、復發酵和證實試驗，通過統計學MPN表判定結果，適用于低菌量樣品檢測。

2. 濾膜法
將水樣通過0.45μm濾膜截留細菌，轉移至M-Endo培養基培養，計數典型菌落，特別適合大體積水樣檢測。

3. 快速檢測技術
? 酶底物法：利用特異性顯色反應，48小時內完成檢測
? 實時熒光PCR：通過核酸擴增實現4小時內快速定量
? ATP生物發光法：適用于現場快速篩查

所有方法均需嚴格執行陰性/陽性對照試驗，實驗室應通過CMA/ 認證，確保檢測數據準確可靠。